組蛋白磷酸化修飾與著絲粒功能的建立、維持相關(guān)。中國科學院遺傳與發(fā)育生物學研究所韓方普研究組從2010年開始從事玉米、小麥H2A和H3的磷酸化修飾與染色體取向、分離等功能研究。由于植物染色體的復雜性及特殊性,一直得到部分不同于酵母及人類的結(jié)果。H2A磷酸化激酶Bub1的定位及細胞周期變化,結(jié)合RNAi與H2A磷酸化信號變化,在玉米特殊的微小染色體、減數(shù)分裂突變體中發(fā)現(xiàn)這一復合物與減數(shù)分裂I染色體著絲粒的取向無關(guān),與著絲粒的活性相關(guān)的研究結(jié)果已于2017年初發(fā)表在NewPhytologist上。科研人員一直試圖找到H3T3磷酸化與染色體動態(tài)變化、著絲粒活性的關(guān)系及其變化的機制。經(jīng)過多年的努力,獲得了H3T3磷酸化的激酶Haspin抗體并詳細進行玉米減數(shù)分裂突變體的細胞學觀察。
體細胞H3T3磷酸化抗體免疫熒光結(jié)果表明:有絲分裂前期及早中期染色體,H3T3磷酸化發(fā)生在姊妹染色體單體間。細胞周期H3T3磷酸化的動態(tài)變化以及玉米減數(shù)分裂突變體的結(jié)果均顯示,H3T3磷酸化與cohesion相關(guān)。有趣的是,失去活性的著絲粒部位在早期出現(xiàn)H3T3磷酸化的信號(圖a)。這一結(jié)果完全不同于H2A磷酸化及H3Ser10磷酸化只發(fā)生在有功能的著絲粒區(qū)。隨著染色體收縮進入中期準備完成染色體的正確取向和分離,H3T3磷酸化信號只在innercentromere出現(xiàn)(圖b)。植物著絲粒區(qū)的H3核小體部分被CENH3核小體取代,但在有絲分裂前期及早中期染色體上,著絲粒區(qū)的CENH3核小體與H3核小體是混合在一起,沒有區(qū)域或是位置的專化性。但染色體進入中期準備開始完成取向分向兩極時,著絲粒區(qū)內(nèi)側(cè)(innercentromere)完全是H3T3核小體形成的區(qū)域;而外側(cè)均是CENH3核小體分布為主。這可能和spindle的正確連接及功能動粒形成密切相關(guān),深入研究動粒蛋白及其調(diào)控過程的工作正進行中。
研究結(jié)果發(fā)表在PlantJournal雜志上,研究工作得到國家自然科學基金委的資助。
組蛋白H3T3磷酸化體細胞染色體前中期到中期的動態(tài)變化模式圖
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